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卫可(R) S杀灭非洲猪瘟病毒的研究报告
来源: | 作者:xjz2012 | 发布时间: 2018-08-24 | 729 次浏览 | 分享到:

一般性研究信息

研究主题: 卫可(R) S消毒剂杀灭非洲猪瘟病毒的有效性试验

研究主管: Stuart Williams

项目编号: Dis P4/2

发起单位: 安德国际集团,

           温德姆大街,奇尔顿西部工业区,萨德伯里,萨福克CO102XD

研究单位: 动物保健研究院

           珀布赖特实验室

           灰石路,珀布赖特,萨里, GU24 0NF

试验产品信息

产品名称:卫可(R) S

生产批号: 6191 22/5/02

研究日期

试验开始时间:18/7,2002

试验结束时间:24/7,2002

试验目的

本次研究的主要目的是测定各种不同稀释浓度的卫可(R) S消毒剂对灭活非洲猪瘟病毒的效果,动物保健研究院设计的研究方案与英国环境、食品和农村事务部注册该消毒剂采用的方案一致并执行现行的感染控制实验室标准操作流程。

研究材料

使用的培养基

从现有猪红细胞中提取猪原始骨髓细胞作为生长培养基,在6CM玻璃管中加上厄尔盐水+15%猪血清进行培养。

试剂

有机培养基描述:1%牛胚胎血清


世界卫生组织硬水(342ppm 硬度):0.305克无水氯化钙,0.139克氢氧化镁溶解到蒸馏水中,10ml牛胚胎血清,最终稀释成1升水溶液。

磷酸盐缓冲液(PBSPH7.2+1% 牛胚血清

试验方法

试验微生物的准备

非洲猪瘟病毒从非洲纯缘蜱群的壁虱中分离出来,这个猪瘟病毒原毒是1983年在非洲马拉维发现的,并且在布莱特实验室的实验猪体内传了两代,使用的原毒取自保存在-70摄氏度的样品。使用磨碎的感染脾脏1/10悬浮液并悬浮于磷酸盐缓冲液+1%牛血清中。猪原髓细胞生长在含有厄尔盐水+15%猪血清的玻璃管中。

试验消毒剂稀释液的准备

2002522日我们接收到赞助商发来的批号为6191的卫可S,试验稀释比例分别设定为1:500,1:600,1:700,1:800. 卫可S首先溶解成10%(重量/体积)的溶液,再用WHO硬水稀释成1:50,1:60,1:70,1:80 溶液+1%牛胚血清中,通过肉眼观察下将试验溶液混合均匀。

试验条件

针对不同的试验消毒液的试验方法,分别提取1ml试验微生物(在含有磷酸盐缓冲液和+1%牛胚血清中)和1ml试验消毒液,混合并加入8ml无菌硬水(含有1%牛胚血清),每个试验混合液放置在4环境中30分钟。

未经处理的对照组,分别加入0.5ml试验微生物和4.5ml无菌WHO硬水+1%牛胚血清。

试验系统验证

在试验过程完成后, 7个10倍系列混合稀释液和未处理对照组就在磷酸盐缓冲体系(1%牛胚血清)中准备好了,这些样品都要接种到PBM试管中培养,每个稀释液组在三个试管间分配1毫升溶液。

一株非洲猪瘟病毒,1978年在马卡分离,PBM中培养并分析出了公认的效价,作为阳性对照。

病毒繁殖与观察

培养试管放置在37℃并培养6天,每天检查血细胞吸附情况。 阳性培养组是那些试管中吸血细胞(HAD)出现。HAD细胞会感染猪的红细胞,出现在培养过程中,吸附血细胞。

研究记录保存

记录保存

本次研究的原始数据将被送到动物保健研究院、珀布赖特莱特实验室灰石路,珀布赖特,萨里, GU24 0NF 存档并保存至少7年。

试验材料保存

本次研究试验材料将被保存在动物保健研究院、珀布赖特莱特实验室灰石路,珀布赖特,萨里, GU24 0NF至少6个月。安德国际将有责任长期保存试验样品。

试验结果

对照组结果


试验组结果


结论

试验结果证明,在含有1%牛胚血清的硬水条件下,卫可S 1:500的比例稀释溶液30分钟完全暴露接触,可将非洲猪瘟病毒滴度量降低≧4.75 Log10HAD50/ml。

试验结果证明,在含有1%牛胚血清的硬水条件下,卫可S 1:600的比例稀释溶液30分钟完全暴露接触,可将非洲猪瘟病毒滴度量降低≧4.75 Log10HAD50/ml。

试验结果证明,在含有1%牛胚血清的硬水条件下,卫可S 1:700的比例稀释溶液30分钟完全暴露接触,可将非洲猪瘟病毒滴度量降低≧4.75 Log10HAD50/ml。

试验结果证明,在含有1%牛胚血清的硬水条件下,卫可S 1:800的比例稀释溶液30分钟完全暴露接触,可将非洲猪瘟病毒滴度量降低≧4.75 Log10HAD50/ml。

 

试验完成人:G Hutchings.

复审人(项目主管)Stuart Williams.


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